BOD(生化需氧量)是反映水體中可生物降解有機(jī)物含量的重要指標(biāo),bod測定儀通過模擬自然環(huán)境中微生物的代謝過程,測量水體在一定時間內(nèi)的耗氧量。為保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性,測量過程需遵循嚴(yán)格的要求,覆蓋樣品處理、儀器操作、環(huán)境控制等多個環(huán)節(jié)。 一、樣品采集與預(yù)處理要求 樣品的代表性是BOD測定的基礎(chǔ)。采集水樣時,需使用清潔、無污染的容器(如玻璃瓶),避免容器內(nèi)壁殘留的洗滌劑、有機(jī)物等干擾微生物活性。采樣過程中應(yīng)充滿容器并密封,減少樣品與空氣接觸,防止溶解氧含量變化——尤其是厭氧水樣,需在采樣后立即隔絕空氣,避免氧氣進(jìn)入影響后續(xù)耗氧測量。 樣品預(yù)處理需根據(jù)水質(zhì)特性調(diào)整。若水樣中含有余氯(如自來水、消毒后的廢水),需加入硫代硫酸鈉去除,余氯會抑制微生物活性,導(dǎo)致BOD值偏低,加入量需通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定,確保完全中和余氯且不引入過量干擾物質(zhì)。對于渾濁水樣,需通過靜置沉淀或低轉(zhuǎn)速離心去除大顆粒懸浮物,避免顆粒物附著微生物或消耗氧氣,影響測定結(jié)果。 水樣的pH值需調(diào)節(jié)至適宜范圍。微生物在pH6.5-7.5的環(huán)境中活性最佳,若水樣過酸或過堿,需用稀鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至中性,調(diào)節(jié)過程中需緩慢攪拌,避免局部酸堿度劇烈變化損傷微生物。此外,對于含高濃度有機(jī)物的水樣(如工業(yè)廢水),需進(jìn)行適當(dāng)稀釋,使測定過程中的耗氧量在儀器檢測范圍內(nèi)(通常5-20mg/L),稀釋用水需為經(jīng)曝氣除氯的純水,并加入適量營養(yǎng)鹽(如磷酸鹽、硫酸鎂),保證微生物代謝需求。 二、儀器操作規(guī)范要求 儀器的校準(zhǔn)與調(diào)試是測量前的必要步驟。使用BOD測定儀前,需檢查溶解氧電極或壓力傳感器的靈敏度,用飽和溶解氧水(如20℃下充分曝氣的純水)校準(zhǔn)溶解氧讀數(shù),確保誤差在允許范圍內(nèi)(通?!?.1mg/L)。若采用壓差法測定儀,需檢查密封系統(tǒng)的氣密性,將充滿水的培養(yǎng)瓶連接至儀器,觀察壓力變化是否穩(wěn)定,若存在漏氣,需更換密封墊或緊固接口,防止外界空氣進(jìn)入影響壓力測量。 培養(yǎng)條件的控制需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)。BOD測定通常需要在20℃±1℃的黑暗環(huán)境中培養(yǎng)5天(即BOD5),溫度波動過大會影響微生物代謝速率,導(dǎo)致耗氧量偏差,因此需確保培養(yǎng)箱或恒溫水浴的溫度穩(wěn)定性,定期校準(zhǔn)溫控系統(tǒng)。培養(yǎng)過程中需避免樣品瓶受到震動或光照,光照可能促進(jìn)藻類生長,額外消耗氧氣,導(dǎo)致測定值偏高。 樣品接種與稀釋操作需規(guī)范。對于缺乏微生物的水樣(如經(jīng)過消毒的廢水、地下水),需接種適量的微生物菌種(如市政污水處理廠的活性污泥上清液),接種量通常為水樣體積的1%-5%,確保水樣中微生物濃度適宜。稀釋操作需使用虹吸法,避免劇烈攪拌產(chǎn)生氣泡,稀釋后的水樣需輕輕搖勻,使微生物和有機(jī)物分布均勻,同時避免溶解氧含量劇烈變化。 三、環(huán)境與試劑要求 實(shí)驗(yàn)環(huán)境需滿足微生物活性需求。實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)控制在20℃左右,避免溫度劇烈波動影響培養(yǎng)過程;空氣中應(yīng)避免存在揮發(fā)性有機(jī)物、消毒劑等物質(zhì),防止這些物質(zhì)進(jìn)入培養(yǎng)系統(tǒng)抑制微生物活性。若同時進(jìn)行多個樣品測定,需保證樣品間無交叉污染,操作工具(如移液管、燒杯)需嚴(yán)格清洗消毒,避免殘留物質(zhì)干擾。 試劑的質(zhì)量與保存直接影響測定結(jié)果。稀釋用水需符合標(biāo)準(zhǔn)要求,需經(jīng)曝氣去除二氧化碳和揮發(fā)性有機(jī)物,同時加入磷酸鹽緩沖液、硫酸鎂、氯化鈣等營養(yǎng)鹽,維持水樣的滲透壓和營養(yǎng)平衡,試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,或在4℃下冷藏保存,有效期不超過1周。接種用的微生物菌種需保持活性,若使用商業(yè)化菌種,需嚴(yán)格按照說明書保存和活化,避免菌種老化或失活。 標(biāo)準(zhǔn)溶液的使用需規(guī)范。校準(zhǔn)儀器或驗(yàn)證方法時,需使用葡萄糖-谷氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(BOD5理論值為198mg/L),標(biāo)準(zhǔn)溶液需現(xiàn)配現(xiàn)用,保存時間不超過24小時。通過測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的BOD值,驗(yàn)證儀器和操作的準(zhǔn)確性,若標(biāo)準(zhǔn)溶液測定值與理論值偏差超過±10%,需查找原因(如試劑失效、溫度控制不當(dāng))并重新測定。 四、質(zhì)量控制與數(shù)據(jù)記錄要求 質(zhì)量控制措施需貫穿測量全過程。每批樣品測定時,需同時做空白實(shí)驗(yàn)(僅稀釋水和接種液),空白BOD值應(yīng)小于1.5mg/L,若空白值過高,說明稀釋水或接種液被污染,需重新制備。同時需做平行樣測定,平行樣的相對偏差應(yīng)小于10%,確保操作的重復(fù)性,若偏差過大,需檢查稀釋、接種等環(huán)節(jié)是否存在操作誤差。 數(shù)據(jù)記錄與處理需完整準(zhǔn)確。記錄內(nèi)容應(yīng)包括樣品信息(采樣時間、地點(diǎn)、保存條件)、測定參數(shù)(稀釋倍數(shù)、接種量、培養(yǎng)溫度)、儀器讀數(shù)、環(huán)境條件等,培養(yǎng)前后的溶解氧或壓力變化需準(zhǔn)確記錄,按照標(biāo)準(zhǔn)公式計算BOD值。數(shù)據(jù)處理時需扣除空白值和接種液的耗氧量,確保計算結(jié)果的準(zhǔn)確性。 測定后的樣品與儀器處理需規(guī)范。培養(yǎng)結(jié)束后,樣品需妥善處理,避免環(huán)境污染;儀器需及時清潔,溶解氧電極需按照說明書保養(yǎng)(如浸泡在飽和氯化鉀溶液中),壓力傳感器需校準(zhǔn)歸零,確保下次使用時性能穩(wěn)定。長期不用的儀器需做好防潮、防塵處理,定期通電檢查,防止部件老化。 五、總結(jié) BOD測定儀的測量要求涵蓋樣品采集預(yù)處理、儀器操作、環(huán)境控制、試劑質(zhì)量、質(zhì)量控制等多個方面,核心是保證水樣中微生物活性適宜、培養(yǎng)條件穩(wěn)定、操作規(guī)范無干擾。只有嚴(yán)格遵循這些要求,才能確保測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠,真實(shí)反映水體中可生物降解有機(jī)物的含量,為水環(huán)境質(zhì)量評價、污水處理效果評估等提供科學(xué)依據(jù)。在實(shí)際操作中,需結(jié)合具體水樣特性和儀器型號,靈活調(diào)整操作細(xì)節(jié),同時加強(qiáng)質(zhì)量控制,持續(xù)提升測定水平。
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